小鼠胚胎干細胞；ES-D3（CRL-934）品牌

操作流程：
. 小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存：
.2. 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液（37℃預熱，8～0倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養。
.2.2 細胞傳代 原代培養的hek－293細胞48h換液次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化～2min，將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
.4 細胞的計數 常規消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用0×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×04。
.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數后分別接種于2個25cm2培養瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×00％，計算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數0d，繪制細胞生長曲線

本公司提供的細胞都是現貨供應，詳細小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌說明書！

細胞名稱 小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌
形態特性 球形克隆

生長特性 貼壁生長

特征特性 小鼠胚胎干細胞；在缺乏滋養層或條件培養基時，這株細胞自發分化成胚胎結構。 它們可以注射回胚泡并參與形成生殖系。 未分化細胞可以通過基因靶向技術進行基因改良。貼壁生長；形成球形克隆。

培養條件 干細胞培養基

傳代方法

傳代情況 PN

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌血管平滑肌細胞的再生能力是原發血管病變的重要因素。
（2）表達鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應。
（3）與血管疾病的進展和穩定有關。
 生理變化：
（）主動脈硬化。
（2）主動脈瘤
（3）主動脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌組織來源于正常大鼠大動脈組織。
（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細胞培養末期液氮凍存。
（4）每凍存管細胞數：>5×05 cells/ml。
（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

運輸和保存：
小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
)mL凍存細胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準備好將要使用的消毒后的空培養瓶，放入微波爐內高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預熱好的培養用液：大鼠主動脈平滑肌細胞取出已經預熱好的培養用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
7.從培養箱內取出細胞：注意取出細胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。?

絡塞維 CAS 84954-92-7 訂購|咨詢  規格： HPLC≥98%，20mg/vial

槐角苷 CAS 52-95-4 訂購|咨詢  規格： 20mg

松葉對照藥材 CAS  訂購|咨詢  規格： g

橙黃Ⅱ;Orange Ⅱ CAS 633-96-5 訂購|咨詢  規格： 20mg

茶氨酸 CAS 308-6-6 訂購|咨詢  規格： 20mg

念珠菌顯色對照培養基 CAS  訂購|咨詢  規格： 4.8g/00ml

哈奈德 CAS 3093-35-4 訂購|咨詢  規格： 00mg

貝母堿;Imperialine CAS 6825-98-7 訂購|咨詢  規格： 20mg

柚皮苷查爾 CAS 73692-50-9 訂購|咨詢  規格： HPLC≥98%;20mg

九里香 CAS 9668-69-0 訂購|咨詢  規格： 20mg

酸棗仁皂甙A; 酸棗仁皂苷A CAS 55466-04- 訂購|咨詢  規格： HPLC≥98%,20mg/支

對羥基苯乙酯 CAS 20-47-8 訂購|咨詢  規格： GC≥99%;00mg

小鼠胚胎干細胞；ES-D3(CRL-934)品牌MCT  單羧酸轉運蛋白-抗體 規格: 0.2mlPhospho-Histone H3 (Ser0)  磷酸化組蛋白H3抗體 規格: 0.ml

Connexin-37/GJA4  間隙連接蛋白37抗體 規格: 0.ml

Rabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗小鼠IgM 規格: 0.ml

C20orf32  20號染色體開放閱讀框32抗體 規格: 0.2ml

CCDC60  卷曲螺旋結構域蛋白60抗體 規格: 0.2ml

Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7)  磷酸化熱休克蛋白90α抗體 規格: 0.ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE  PE標記的兔抗小鼠k鏈 規格: 0.mlART3  二磷酸苷核糖基轉移酶3抗體 規格: 0.2ml

Lamin B Receptor  核纖層蛋白B受體抗體 規格: 0.2ml

COMMD0  銅代謝結構域蛋白0抗體 規格: 0.2ml

ERCC6L  發育相關蛋白ERCC6L抗體（乙醇致畸因子） 規格: 0.2ml

Corf83  號染色體開放閱讀框83抗體 規格: 0.2ml