大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

注意事項：
. 接收到大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat EyePrimaCell: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
     大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道。其中，視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性。大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的視網(wǎng)膜組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的視網(wǎng)膜組織能使得視網(wǎng)膜組織中色素上皮細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將色素上皮細(xì)胞分離開來。。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的上皮原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞。

本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）大鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 00ml） （7）大鼠視網(wǎng)膜色素上皮組織預(yù)備液（ x 00 ml） （8）大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書?

B7-H5 / GI24 / VISTA 抗體, 兔多抗 ELISA    200 µg

CD85 / ILT2 / ILR / LILRB 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD300C 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

PDZD / PDZK 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

LFA-3 / CD58 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

CSNKG2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

JAM-A / FR 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Apolipoprotein H / APOH 抗體, 兔單抗 ELISA   IHC-P    50 µg

IL-2R 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

SerpinA8 / Angiotensinogen / AGT 抗體, 兔單抗 ELISA   WB   IF  IP   ICC/IF    50 µg

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書阿尼西坦英文名稱：Arnie Si Staw分子式：29.24分子量： C2H3NO3：72432-0-

5--2-甲氧吡分子式：24.4英文名稱：5- amino -2- a：6628-77-9分子量： C6H8N2O

(R,R)-(+)-2,2'-異亞丙雙(4-叔丁-2-惡唑啉)分子式：294.44英文名稱：(R, R) - (+) -2,2'- isopropylidenebis (4- tert butyl -2- oxazolinyl)：3833-97-分子量： C7H30N2O2

3,3'-二(9H-咔唑-9-)-,'-聯(lián)吡分子式：484.6英文名稱：Two 3,3'- (9H- -9- -,'- bipyridine carbazole)：342638-54-4分子量： C36H24N2

鈷粉/鈷片分子式：58.93英文名稱：Cobalt powder / cobalt film：7440-48-4分子量： Co

色素(水溶)英文名稱：Melanin (Shui Rong)分子式：分子量：：2229872

堿性品藍(lán)英文名稱：Basic blue分子式：分子量：：

(鈀試劑)4-(8-羥-5-喹啉偶氮)萘磺英文名稱：(palladium reagent) 4- (8- hydroxy -5-) naphthalene sulfonic acid分子式：379.39分子量： C9H3N3O4S：26644-96-2

醋環(huán)丙氯地孕酮英文名稱：Acetic acid and chloride分子式：46.94分子量： C24H29ClO4：427-5-0

2--3,5-二溴-6-甲吡分子式：265.94英文名稱：2- amino -3,5- dibromo -6- methyl pyridine：9872-0-5分子量： C6H6Br2N2

培養(yǎng)步驟：
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。