小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

注意事項：
. 接收到小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse FatPrimaCell: Normal Visceral Fat Cells】
     小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒說明書內臟是指在體腔內，借管道直接或間接與外界相通的器官的總稱。主要包括人體胸腹部內臟器官的分布：肝臟、膽囊、胃、腎、小腸、脾、直腸、十二指腸、胰、輸尿管、卵巢、膀胱、子宮。其中，小鼠內臟脂肪細胞主要存在于結締組織中，能夠合成和貯存脂肪。成熟的脂肪細胞呈圓形，胞漿內富含脂滴。脂肪細胞在脂類代謝，能量平衡以及抵抗炎癥等方面起重要作用，與肥胖，高血脂、糖尿病、乳癌等多種生理疾病密切相關。 利用本公司試劑盒中提供的內臟組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的內臟組織能使得內臟組織中脂肪細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將脂肪細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠內臟脂肪細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的脂肪原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的內臟脂肪細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠內臟脂肪細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠內臟脂肪細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠內臟脂肪細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）小鼠內臟脂肪組織洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠內臟脂肪細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠內臟脂肪細胞基礎培養(yǎng)基（5 x 00ml） （7）小鼠內臟脂肪組織預備液（ x 00 ml） （8）小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書?

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

AsPC-(人胰腺細胞)5×06cells/瓶×2

芽孢桿菌屬 Bacillus sp.

Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格：

粘紅酵母 Rhodotorula glutinis

黑木耳 Auricularia auricula

中國倉鼠卵巢細胞英文名稱：

小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基00mL

平滑正青霉 Eupenicillium levitum

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒說明書依普黃酮英文名稱：Ipriflavone分子式：280.32分子量： C8H6O3：3522-22-7

4-四氫吡喃分子式：38.54英文名稱：4- - four hydrogen pyran：836-77-7分子量： C2H6Cl3NO3

3,5-二甲并(B)硫代分子式：62.25英文名稱：3,5- two methyl benzene (B)：964-45-0分子量： C0H0S

2,4-二磺酰二氯均*分子式：37.2英文名稱：2,4- two chloride two chloride three：68985-08-0分子量： C9H0Cl2O4S2

N-氨丙啡啉分子式：44.2英文名稱：N- aminopropyl morpholine：23-00-2分子量： C7H6N2O

四亞甲亞砜分子式：04.7英文名稱：Methylene four：600-44-8分子量： C4H8OS

4,6-二甲-2-巰嘧分子式：40.2英文名稱：4,6- two methyl -2-：22325-27-5分子量： C6H8N2S

-[2-(三氟甲)]咪唑分子式：22.8英文名稱：-[2- (three f) phenyl]：2537-96-4分子量： C0H7F3N2

2,5-二氯吡分子式：47.99英文名稱：2,5- two：60-09-分子量： C5H3Cl2N

乙酸分子式：50.8英文名稱：Phenyl acetic acid：937-39-3分子量： C8H0N2O

培養(yǎng)步驟：
小鼠內臟脂肪細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。