小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒說明書

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小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒【Mouse EyePrimaCell: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
     小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒說明書視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。其中，視網膜色素上皮參與循環，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。小鼠視網膜色素上皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 利用本公司試劑盒中提供的視網膜組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的視網膜組織能使得視網膜組織中色素上皮細胞的一些功能特性發生改變，從而將色素上皮細胞分離開來。。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒適合于培養小鼠的視網膜色素上皮細胞。

本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠視網膜色素上皮細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠視網膜色素上皮細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠視網膜色素上皮細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）小鼠視網膜色素上皮組織洗液（5 x 00 ml） （5）小鼠視網膜色素上皮細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）小鼠視網膜色素上皮細胞基礎培養基（5 x 00ml） （7）小鼠視網膜色素上皮組織預備液（ x 00 ml） （8）小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒使用說明書
培養步驟：
小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

人腦靜脈血管平滑肌細胞*培養基00mL

佛羅里達側耳 Pleurotus florida

小鼠垂體瘤細胞英文名稱：

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

運動發酵單胞菌 Zymomonas mobilis

His標簽蛋白裂解液20 ug

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺氟耐藥英文名稱：

人腺上皮細胞*培養基00mL

小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒說明書7-氟-2-甲喹啉分子式：6.8英文名稱：7- -2- methyl group：28-74-分子量： C0H8FN

鹽酸吖分子式：5.56英文名稱：Acridine hydrochloride：7784-47-3分子量： C3H9N·HCl

5-溴-2-甲-3-硝吡分子式：27.02英文名稱：5- -2- -3- nitro pyridine：9434-05-4分子量： C6H5BrN2O2

2-溴-3-氯-5-三氟甲吡分子式：260.44英文名稱：2- -3- three f：75806-84-7分子量： C6H2BrClF3N

聚乙英文名稱：PE分子式：分子量： [C2H4]n：9002-88-4

糖精鈉英文名稱：Saccharin sodium分子式：205.7分子量： C7H4NNaO3S·xH2O：82385-42-0

3-氯--丙英文名稱：3- --分子式：94.54分子量： C3H7ClO：627-30-5

小白菊內酯英文名稱：White Chrysanthemum分子式：248.32分子量：C5H20O3：20554-84-

2-溴嘧分子式：58.98英文名稱：2- bromide：4595-60-2分子量： C4H3BrN2

4,4'-二甲聯甲酰分子式：英文名稱：4,4'- two methyl group：分子量：

注意事項：
. 接收到小鼠視網膜色素上皮細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。