小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)

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小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】
     小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)腎小球（glomerulus）為血液過濾器，腎小球毛細血管壁構(gòu)成過濾膜。其中，小鼠腎小球內(nèi)皮細胞分離自小鼠腎組織，腎小球內(nèi)皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞，能夠調(diào)節(jié)腎小球過濾。它是組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分，與腎小球的病理生理過程有關(guān)。小鼠腎小球內(nèi)皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然腎小球內(nèi)皮組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的腎小球內(nèi)皮組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的腎小球內(nèi)皮組織片能使得腎小球內(nèi)皮細胞一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎小球內(nèi)皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠腎小球內(nèi)皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的腎小球內(nèi)皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠腎小球內(nèi)皮細胞組織解離液 (3×ml) （2）小鼠腎小球內(nèi)皮細胞組織處理緩沖液 (00ml) （3）FibrOutTM小鼠腎小球內(nèi)皮細胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）小鼠腎小球內(nèi)皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）小鼠腎小球內(nèi)皮細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠腎小球內(nèi)皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）小鼠腎小球內(nèi)皮組織預備液 ( x 00 ml) （8）小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠肺動脈成纖維細胞*培養(yǎng)基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)蘇云金芽胞桿菌多窩亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tolwerthi

酸鏈球菌 Lactococcus lactis纖細正青霉 Eupenicillium gracilentum

HCT 6(人結(jié)腸細胞)香菇 Lentinula edodes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae6-0B, 人鼻咽細胞系

黑曲霉 Aspergillus niger糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

大鼠腦成纖維細胞*培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactisRIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)

阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii屎腸球菌 Enterococcus faecium

小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)*英文名稱：Cefadroxil分子式：363.39分子量：C6H7N3O5S：66592-87-8

6-METHOXY-2-OXO-,2,3,4-TETRAHYDROQUINOLINE-4-CARBOXYLICACID英文名稱：ACID 6-METHOXY-2-OXO-,2,3,4-TETRAHYDROQUINOLINE-4-CARBOXYLIC分子式：分子量： CHNO4：959237-42-4

2-(4-BOC-PIPERAZINYL)-2-(2-TRIFLUOROMETHYL-PHENYL)ACETICACID英文名稱：2- (4-BOC-PIPERAZINYL) -2- (2-TRIFLUOROMETHYL-PHENYL) ACID ACETIC分子式：388.38分子量： C8H23F3N2O4：885274-23-7

羅卡因英文名稱：Ropivacaine分子式：274.4分子量： C7H26N2O：84057-95-4

5-芐硫四氮唑分子式：92.24英文名稱：5- benzylthio tetrazoline：287-47-6分子量： C3H6N4S

-CBZ-4--分子式：248.32英文名稱：-CBZ-4- amino piperidine：57023-34-2分子量： C4H20N2O2

四溴甲分子式：449.8英文名稱：Four bromine toluene：5442-9-8分子量： C0H0Br4

4-丁啉分子式：43.23英文名稱：4- butyl morpholine：005-67-0分子量： C8H7NO

2-氯乙砜分子式：204.67英文名稱：2- ethyl phenyl group：938-09-0分子量： C8H9ClO2S

2--5-甲吡分子式：08.4英文名稱：2- amino -5- methyl pyridine：603-4-4分子量： C6H8N2

注意事項：
. 接收到小鼠腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%*-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。