注意事項：
. 接收到小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】
     小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠支氣管平滑肌，呈長紡錘形纖維狀分布。該細(xì)胞在維持氣道張力維持支氣管形態(tài)中起重要作用，氣道平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點和調(diào)節(jié)機制是實現(xiàn)氣管正常生理功能的基礎(chǔ)。 雖然支氣管組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的支氣管組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的支氣管組織片能使得支氣管組織中成支氣管細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成支氣管細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成支氣管細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成支氣管原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的成支氣管組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠支氣管平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5x00 ml） （7）小鼠支氣管平滑肌組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書?

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum293E(人胚腎細(xì)胞（EBNA基因修飾）)

鉛色青霉 Penicillium lividum葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

黑曲霉 Aspergillus niger大腸桿菌 Escherichia coli

RWPE(人前列腺上皮細(xì)胞)串珠菌 Leuconostoc lactis

桿菌屬 Lactobacillus sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

根瘤菌MDA-MB-23, 人腺細(xì)胞

U4(小鼠子宮頸細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

日本曲霉 Aspergillus japonicus5637, 人膀胱細(xì)胞

燕麥鐮孢屎腸球菌 Enterococcus faecium

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis香菇 Lentinula edodes

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書3-甲-4-吡唑分子式：208英文名稱：3- methyl -4-：5802-75-2分子量： C4H5IN2

2-甲吡氧物分子式：09.3英文名稱：2- methyl pyridine oxide：93-9-分子量： C6H7NO

地膚子皂苷Ic英文名稱：Momordin Ic分子式：764.93906分子量：C4H64O3：96990-8-0

五味子提取物英文名稱：Extract of Fructus分子式：分子量：：

2-(5-溴-2-吡偶氮)-5-二甲酚分子式：32.8英文名稱：2- (5-) -5- two：50783-82-9分子量： C3H3BrN4O

重鉻酸喹啉分子式：476.33英文名稱：Dichromate quinoline：56549-24-7分子量： C8H6Cr2N2O7

2-氯-5-氯甲吡分子式：62.02英文名稱：2- -5- chloride：70258-8-3分子量： C6H5Cl2N

6-氮雜胸腺嘧分子式：27.英文名稱：6- azathymine：932-53-6分子量： C4H5N3O2

菲英文名稱：Philippines分子式：78.23分子量： C4H0：3055

胺藍(lán)（水溶）英文名稱：Aniline blue (Shui Rong)分子式：737.72分子量： C32H25N3Na2O9S3：2863-66-5

培養(yǎng)步驟：
小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。