小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒說明書

注意事項：
. 接收到小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒【Mouse AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】
     小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒說明書小鼠支氣管平滑肌細胞分離自正常小鼠支氣管平滑肌，呈長紡錘形纖維狀分布。該細胞在維持氣道張力維持支氣管形態中起重要作用，氣道平滑肌特異的超微結構特點和調節機制是實現氣管正常生理功能的基礎。 雖然支氣管組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的支氣管組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的支氣管組織片能使得支氣管組織中成支氣管細胞的一些功能特性發生改變，從而將成支氣管細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成支氣管細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成支氣管原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒適合于培養人的成支氣管組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠支氣管平滑肌細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠支氣管平滑肌細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠支氣管平滑肌細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠支氣管平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠支氣管平滑肌細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠支氣管平滑肌細胞基礎培養基（5x00 ml） （7）小鼠支氣管平滑肌組織預備液（ x00 ml） （8）小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒使用說明書?

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum293E(人胚腎細胞（EBNA基因修飾）)

鉛色青霉 Penicillium lividum葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

黑曲霉 Aspergillus niger大腸桿菌 Escherichia coli

RWPE(人前列腺上皮細胞)串珠菌 Leuconostoc lactis

桿菌屬 Lactobacillus sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

根瘤菌MDA-MB-23, 人腺細胞

U4(小鼠子宮頸細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

日本曲霉 Aspergillus japonicus5637, 人膀胱細胞

燕麥鐮孢屎腸球菌 Enterococcus faecium

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis香菇 Lentinula edodes

小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒說明書3-甲-4-吡唑分子式：208英文名稱：3- methyl -4-：5802-75-2分子量： C4H5IN2

2-甲吡氧物分子式：09.3英文名稱：2- methyl pyridine oxide：93-9-分子量： C6H7NO

地膚子皂苷Ic英文名稱：Momordin Ic分子式：764.93906分子量：C4H64O3：96990-8-0

五味子提取物英文名稱：Extract of Fructus分子式：分子量：：

2-(5-溴-2-吡偶氮)-5-二甲酚分子式：32.8英文名稱：2- (5-) -5- two：50783-82-9分子量： C3H3BrN4O

重鉻酸喹啉分子式：476.33英文名稱：Dichromate quinoline：56549-24-7分子量： C8H6Cr2N2O7

2-氯-5-氯甲吡分子式：62.02英文名稱：2- -5- chloride：70258-8-3分子量： C6H5Cl2N

6-氮雜胸腺嘧分子式：27.英文名稱：6- azathymine：932-53-6分子量： C4H5N3O2

菲英文名稱：Philippines分子式：78.23分子量： C4H0：3055

胺藍（水溶）英文名稱：Aniline blue (Shui Rong)分子式：737.72分子量： C32H25N3Na2O9S3：2863-66-5

培養步驟：
小鼠支氣管平滑肌細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。