小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒培養

小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒【Mouse Airway PrimacellTM：Normal Bronchial Fibroblasts】
  小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒培養小鼠支氣管成纖維細胞分離自正常小鼠支氣管組織，呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。成纖維細胞是結締組織中常見的一種細胞。可在支氣管創傷后修復組織。 雖然支氣管組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的支氣管組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的支氣管組織片能使得支氣管組織中成支氣管細胞的一些功能特性發生改變，從而將成支氣管細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成支氣管細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成支氣管原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒適合于培養人的成支氣管組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠支氣管成纖維細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠支氣管成纖維細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠支氣管成纖維細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠支氣管成纖維細胞組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠支氣管成纖維細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠支氣管成纖維細胞基礎培養基（5x00 ml） （7）小鼠支氣管成纖維細胞組織預備液（ x00 ml） （8）小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒使用說明書

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注意事項：
. 接收到小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒培養，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：
小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae大鼠腸靜脈內皮細胞*培養基

大豆慢生根瘤菌植物桿菌 Lactobacillus plantarum

人結腸細胞根瘤菌 Rhizobium sp.

果香地霉 Colletotrichum musae酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

球孢鏈霉菌 Streptomyces globisporus雙孢蘑菇

大鼠角膜內皮細胞*培養基小鼠結腸平滑肌細胞*培養基

消化桿菌 Lactobacillus alimentarius人前列腺平滑肌細胞*培養基

香菇 Lentinula edodes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

293A，人胚腎上皮細胞系（腺病毒包裝級別）豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

天藍色鏈霉菌 Streptomyces coelicolorVero(非洲綠猴腎細胞)

小鼠支氣管成纖維細胞培養試劑盒培養4--2-硝甲分子式：52.5英文名稱：4- amino -2- nitro toluene：9-32-4分子量： C7H8N2O2

3,5-二吡唑分子式：220.28英文名稱：3,5-二吡唑：45-0-3分子量： C5H2N2

2,3,5-三氟吡分子式：33.07英文名稱：2,3,5- three：76469-4-5分子量： C5H2F3N

4--6-羥-2-甲嘧二水合物分子式：6.6英文名稱：4- amino -6- hydroxyl group -2- two hydrate：388582-4-0分子量： C5HN3O3

2-正戊呋喃分子式：38.2英文名稱：2- pentyl furan：3777-69-3分子量： C9H4O

4-二甲吡(DMAP)分子式：22.7英文名稱：4- two (DMAP)：22-58-3分子量： C7H0N2

4-硝鄰二甲分子式：5.646英文名稱：4- nitro ortho xylene：99-5-4分子量： C8H9NO2

丹磺酰英文名稱：Dansyl chloride分子式：分子量：：605-65-2

四氫異喹啉分子式：33.9英文名稱：Four hydrogen ISO：9-2-4分子量： C9HN

NBD-CO-Hz分子式：266.22英文名稱：NBD公司赫茲：22263-97-4分子量： C9H0N6O4