大鼠腎足突細胞說明書

注意事項：
. 接收到大鼠腎足突細胞說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

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大鼠腎足突細胞【RatKidney:KidneyPodocytes】
    大鼠腎足突細胞說明書 產品描述：腎足突細胞是附著在腎小球基底膜外的高度分化的上皮細胞。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30～40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4～6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統的后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發揮關鍵作用。公司提供的大鼠腎足突細胞采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養采用公司產品大鼠腎足突細胞培養試劑盒(RatKidneyPrimaCell™:NormalKidneyPodocytesCatNo.3-728)來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，大鼠腎足突細胞可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
      發貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h，再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。?

A72(人腦膠質瘤細胞)大鼠肺大靜脈內皮細胞*培養基

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus植物桿菌 Lactobacillus plantarum

香菇 Lentinula edodes根瘤菌 Rhizobium sp.

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus球毛殼 Chaetomium globosum

苜蓿中華根瘤菌宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

生孢梭菌 Clostridium sporogenesNR8383(大鼠肺泡巨噬細胞)

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti桿菌屬 Lactobacillus sp.

人絨毛間充質成纖維細胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

H9c2大鼠心肌細胞（ATCC來源）TBS

大鼠腎足突細胞說明書2-乙氧吡分子式：23.5英文名稱：2-, B：4529-53-4分子量： C7H9NO

3-氯-2-甲氧吡分子式：43.57英文名稱：3- chloride -2- a：3472-84-9分子量： C6H6ClNO

偏磷酸鉀分子式：8.07英文名稱：Potassium potassium phosphate：7790-53-6分子量： KO3P

二硼鈦分子式：69.49英文名稱：Titaniumdiboride：2045-63-5分子量： B2Ti

,2-二乙氧乙烷英文名稱：,2- two ethylene oxide分子式：8.7分子量： C6H4O2：629-4-

原花青素B2英文名稱：The original anthocyanin B2分子式：578.5234分子量：C30H26O2：2906-49-8

原花青素B3英文名稱：The original anthocyanin B3分子式：578.529分子量：C30H26O2：23567-23-9

3-酚英文名稱：3- amino phenol分子式：09.3分子量： C6H7NO：59-27-5

二甲酚橙英文名稱：Two xylenol orange分子式：76.62分子量： C3H32N2O3S:C3：6-35-4

硫酸鉀分子式：97.8英文名稱：Potassium thiocyanate：333-20-0分子量： KSCN

培養步驟：
大鼠腎足突細胞說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。