人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)

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人呼吸道上皮細胞【HumanAirway:NormalAirwayEpithelialCells】
     人呼吸道上皮細胞培養(yǎng) 產(chǎn)品描述：呼吸道上皮細胞取自人肺組織，呼吸道上皮細胞是由纖毛、無纖毛和能分泌黏液的細胞按照從近端到遠端呼吸道分布的混合細胞群組成。這類細胞的各個亞型細胞各具特點，從而不僅能形成物理屏障，可有效的防止多種有毒物質(zhì)，而且通過產(chǎn)生和分泌大量化學(xué)介質(zhì)和細胞因子形成高度復(fù)雜的宿主防御系統(tǒng)。公司提供的人呼吸道上皮原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人呼吸道上皮原代細胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)試劑盒(HumanAirwayPrimaCell™:NormalAirwayEpithelialCellsCatNo.3-0043)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，人呼吸道上皮原代細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標準。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
培養(yǎng)步驟：
人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

雅致放射毛霉 Actinomucor elegans青霉 Penicillium sp.

田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans根瘤菌 Rhizobium sp.

ACHN(人腎細胞)大鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti黑曲霉 Aspergillus niger

PIEC(豬髖動脈內(nèi)皮細胞 )大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescensP3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞)

黑木耳 Auricularia auricula桿菌屬 Lactobacillus sp.

中分子量單一蛋白Marker（45 kD）苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

小鼠肝星形細胞*培養(yǎng)基TF-(人血液白血病細胞)

葡萄球菌屬 Staphylococcus sp.酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)3--6-甲-2-羥吡分子式：34.4英文名稱：3- cyano -6- methyl -2- hydroxypyridine：424-27-4分子量： C7H6N2O

7---甲吲唑分子式：英文名稱：7- amino -- methyl indazole：4926-06-分子量： C8H9N3

戊唑英文名稱：Tebuconazole分子式：307.82分子量： C6H22ClN3O：07534-96-3

氟喹唑英文名稱：F, f分子式：376.7分子量： C6H8Cl2FN5O：36426-54-5

辛弗林英文名稱：Synephrine分子式：67.20502分子量：C9H3NO2：34520

5-異丙-2-嘧分子式：37.8英文名稱：5- -2- amino group：98432-7-8分子量： C7HN3

標準溶液英文名稱：Phenolphthalein standard solution分子式：38.33分子量： C20H4O4：28376

9,9'-(,3-)二-9H-咔唑分子式：408.49英文名稱：9,9'- (,3- phenyl) two -9H- carbazole：550378-78-4分子量： C30H20N2

二氟偶酰分子式：246.2英文名稱：Two - benzils：579-39-5分子量： C4H8F2O2

2-溴-5-羥吡分子式：74英文名稱：2- -5- hydroxy pyridine：5577-40-3分子量： C5H4BrNO

注意事項：
. 接收到人呼吸道上皮細胞培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。