人成骨細胞說明書

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人成骨細胞【Human Bone: Normal Osteoblasts】
     人成骨細胞說明書 產(chǎn)品描述：成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。公司提供的人成骨原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人成骨原代細胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)美國IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品人成骨細胞培養(yǎng)試劑盒(Human Bone PrimaCell™: Normal Osteoblasts Cat No. 3-000)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人成骨原代細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
培養(yǎng)步驟：
人成骨細胞說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人肺腺癌細胞，NCI-H975細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肺腺癌細胞，SPC-A細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌(HBV) ，Hep G2.2.5細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞氟耐藥株，Bel/Fu細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞系，Hep-3B細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，Bel-7402細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，Bel-7404細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，Bel-7405細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，Hep G2細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，huh-7.5.細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，huh-7.5細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，huh-7細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，MHCC-97L細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，SMMC-772細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，SNU387細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝癌細胞，SNU449細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人肝星形細胞，LX-2細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系，5-8F細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞，95-D細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細胞，MHCC-97H細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系
人細胞，C33A細胞  x 0^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 細胞系

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注意事項：
. 接收到人成骨細胞說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。