小鼠蛋白激酶B（PKB）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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產(chǎn)品名稱：小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱： PKB ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
存儲條件：2-8℃
有效期：6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床 。

小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標(biāo)記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測抗體、
（四）競爭法。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。

ONPG 干粉    g    
液相內(nèi)毒素清除劑    00 次    
RNase-free Tris HCl,M,pH 7.5    00mL    
間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 - 無血淸    5mL    
20403-300    蝦堿性磷酸酶    300U
CAS8795-38-6    藍(lán)色葡聚糖 2000    g
23-0670-50    S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 )    50mg
00884-2.5    IPTG 干粉    2.5g
D- 果糖 -6- 磷酸二    00mg    
3- 苯甲酰丙酸    5g    
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )    g    
人重組 AP(c-Jun)    50fpu    
人源脫嘌呤 / 脫嘧啶 (AP) 核酸內(nèi)切酶激酶    000U    
動物細(xì)胞裂解液 A    50mL    
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，異硫氰酸熒光素標(biāo)記    000 μL   對三氟腈    分子式：    7.2    分子量：    C8H4F3    英文名稱：    Tothreef    ：    455-8-5
對三聯(lián)    分子式：    230.3    分子量：    C8H4    英文名稱：    Tothree    ：    92-94-4
對叔丁甲(PTBT)    分子式：    48.24    分子量：    CH6    英文名稱：    Paratertbutyltoluene(PTBT)    ：    98-5-
對叔丁甲酰    分子式：    92.26    分子量：    CH6N2O    英文名稱：    Tertbutylphenylhydrazine    ：    4300-38-5
對叔丁氯    分子式：    68.66    分子量：    C0H3CL    英文名稱：    Paratertbutylchloride    ：    3972-56-3
對四聯(lián)    分子式：    306.4    分子量：    C24H8    英文名稱：    P-quaterphenyl    ：    35-70-6
對位紅    英文名稱：    ParaRed    ：    640/0/2    分子式：    293.28    分子量：    C6HN3O3
對五聯(lián)    分子式：    382.5    分子量：    C30H22    英文名稱：    Tofive    ：    3073-05-0
對香豆    英文名稱：    Forsweetbeanacid    ：    50-98-4    分子式：    64.5802    分子量：    C9H8O3
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格對香豆    英文名稱：    Forsweetbeanacid    ：    50-98-4    分子式：    64.5802    分子量：    C9H8O3
對硝碘    分子式：    249.0    分子量：    C6H4INO2    英文名稱：    Onm-nitroiodobenzene    ：    636-98-6
對硝磺酰    分子式：    22.62    分子量：    C6H4ClNO4S    英文名稱：    Nitrophenylsulfonylchloride    ：    98-74-8
對硝甲    英文名稱：    Paranitrotoluene    ：    99-99-0    分子式：    37.4    分子量：    C7H7NO2