小鼠核因子-κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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產(chǎn)品名稱：小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱： NF-κB p65 ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
存儲條件：2-8℃
有效期：6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床 。

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標(biāo)記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測抗體、
（四）競爭法。
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍，即為陽性。

streptomycin/BSA  偶聯(lián)牛血清白蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    規(guī)格:     2mg    
高氏一號合成培養(yǎng)基    *    250(g)        
麥芽浸膏湯    *    200(g)        
酪蛋白胨聚脂肉湯    *            
SIMMONS citrate agar simmons檸檬酸鹽瓊脂    *    .0250.0500    MERCK默克    
5060    *    蛋白胨    BR    ㎏
示蛋白胨（Proteose Peptone）    *    Oxoid    500g    
    *        Peptone 蛋白胨    500g
    *    902        Kg/袋
    *    0205    糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基    250g/瓶
    *    094    牛心湯瓊脂    250g/瓶
    *    27    TGY 肉湯培養(yǎng)基    250g/瓶T7 tag  T7 tag標(biāo)簽抗體    規(guī)格:     0.ml
DHPS  短鏈脫還原酶抗體    規(guī)格:     0.2ml
MCT  單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-抗體    規(guī)格:     0.2ml
MAP7D/RPRC  氨酸/富含卷曲蛋白抗體    規(guī)格:     0.2ml
Mouse Anti-human IgG/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgG    規(guī)格:     0.3ml
Defensin β2  防御素β2抗體    規(guī)格:     0.ml
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格IFNA0/Interferon alpha0/Interferon alpha C  干擾素α0抗體    規(guī)格:     0.2ml
GRB0  生因子受體結(jié)合蛋白0抗體    規(guī)格:     0.2ml
JMJD5  組蛋白去甲基化酶JMJD5抗體    規(guī)格:     0.2ml
SLC33A  乙酰轉(zhuǎn)運蛋白抗體    規(guī)格:     0.2ml
phospho-B-Raf (Ser602)  磷酸化B-Raf抗體    規(guī)格:     0.ml
phospho-ANTXR(Tyr382)  磷酸化瘤管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體    規(guī)格:     0.ml
Calbindin/Calbindin D28k  鈣結(jié)合蛋白D28K抗體    規(guī)格:     0.2ml