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人骨肉瘤細(xì)胞+LUC;U20S-LUC-PURO
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
人骨肉瘤細(xì)胞+LUC;U20S-LUC-PURO正在出售的產(chǎn)品：大鼠骨髓瘤細(xì)胞;IR983F RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8
人骨肉瘤細(xì)胞+LUC;U20S-LUC-PURO
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類(lèi) | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱(chēng)；U2OS-LUC-PURO；人骨肉瘤細(xì)胞株-熒光素酶標(biāo)記；人骨肉瘤細(xì)胞株-LUC-PURO
種屬來(lái)源；人
組織來(lái)源；骨
生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))
Luciferase U-2 OS細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。U-2OS細(xì)胞(原名2T)是由Ponten·J和Saksela·E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U-2 OS細(xì)胞與WI-38細(xì)胞共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF法)未檢測(cè)到病毒。 |
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠巢蛋白(NID)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： NID ELISA Kit
Mouse C peptide (C-Peptide) ELISA Kit 小鼠C肽(C-Peptide)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLDLR(Humanverylowdensitylipoproteieceptor)ELISAKit人低密度脂蛋白受體
通用型HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitINS猴胰島素
10% SDS 100ml
TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4 0.5mgTSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗原
GSK3B重組人 GSK3B 蛋白 Protein
GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
KDR Protein Human 重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
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GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
10% SDS 100ml
KDR Protein Human 重組人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GSK3B重組人 GSK3B 蛋白 Protein
人骨肉瘤細(xì)胞+LUC;U20S-LUC-PURO小鼠白介素27(IL-27)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human deoxypyridinoline crosslinks (DPD) ELISA Kit 人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)檢測(cè)試劑盒
HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 人骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancarboxyhemoglobin,HbCO檢測(cè)試劑盒人血紅蛋白(HbCO)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組腺病毒構(gòu)建試劑盒1套
Humansolublecytokinereceptor，sCKRELISAKit人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子孕激素/孕(PROG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠巨噬細(xì)胞癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
